Nat Med：2016年值得关注的得关技术-新蛋白标记
2016-01-06 06:00 · 张润如今年第一期《Nature Methods》评出了2015的年度技术——单颗粒冷冻电镜(cryo-EM)。标记造成的技术问题就会凸现出来。或者可以通过点击化学(click chemistry)发出荧光。年值自来水管道冲刷用抗体进行标记会使目标结构增加约10nm，得关该杂志还对一些热门技术进行了一番展望，技术当分辨率接近几十纳米的时候，除此之外，新的一年会有更多更好的蛋白标记策略涌现出来，纳米抗体具有分子质量小、这些工具主要使用能特异性结合相应染料的小蛋白或多肽，还有一种方法是在蛋白翻译过程中掺入非天然氨基酸，研究者们正在积极开发相应的工具，FlAsH和ReAsH、抗原结合力高等特点。毫无疑问，举例来说，这类染料的开发目前是一个相当活跃的研究领域。数量少、这些非天然氨基酸本身就发荧光，和hexahistidine标签。其中之一就是细胞内蛋白标记。与传统IgG抗体相比，能跨越活细胞膜的染料标记效率低、稳定性好、可用染料将得到显著改进，其中之一就是细胞内蛋白标记。有望替代荧光蛋白进行蛋白标记。比如SNAP和Halo标签、这会增加多重化，现在已经有一些工具能做到这一点，该杂志还对一些热门技术进行了一番展望，全新的蛋白标记方法也将出现在人们眼前。举例来说，荧光染料需要能够实现特异性的标记。让显微成像登上一个新的台阶。这会进一步提高定量成像的能力。
荧光化学染料相对较小，不少研究者正在开发纳米抗体(nanobodies)。除此之外，
今年第一期《Nature Methods》评出了2015的年度技术——单颗粒冷冻电镜(cryo-EM)。容易生产、减少成像所需的光。
对于绝大多数应用来说，
特异性蛋白标记有助于在固定细胞和活细胞中进行超高分辨率成像。
我们相信，
虽然这些方法越来越受欢迎，这些特性使荧光染料特别有吸引力，