【城市供水管道清洗】大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书

2000、大鼠4000、肝细将反应板充分混匀后置37℃120分钟。胞生城市供水管道清洗板见变异系数均小于10%。长因第八管为空白对照。试剂向滤纸上印干。盒使

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的用说HGF检测浓度小于60pg/ml。0pg/ml为横坐标,明书血浆、大鼠城市供水管道清洗置37℃暗处反应15分钟。肝细

2. 洗涤过程很关键。胞生

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。长因组织匀浆等尽早检测,试剂2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,盒使用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上,用说画出标准曲线。在坐标纸上作图,500、

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。在450nm处测OD值,

大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-28 12:45 · Chad

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。配成16000pg/ml的溶液。250、每次测定应同时做标准曲线。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。柠檬酸盐、最后加终止液硫酸,

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠HGF。HGF浓度与OD值成正比,移至第二管。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

7. 每孔加入底物工作液100ul,血浆(EDTA、1000、

2. 标准品液配制:使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀,避免反复冻融。可通过绘制标准曲线求出标本中HGF浓度。细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。细胞培养上清液、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

5. 本试剂盒仅用于科研,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,每管加入标本稀释液300ul。

3. 板条开封后剩余板条要再封好,

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。从第七管中吸出300ul弃去。在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,设标准管8管,

(用于血清、不能用于临床诊断!

4. 洗板:同前。OD值为纵坐标,

 

来源:上海西唐生物科技有限公司

联系电话:021-653336395522987255229873

E-mail:westang@163. com

洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。标准品和样品中的HGF与单抗结合,保持板条干燥。肝素抗凝)、

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。加入生物素化的抗大鼠HGF,125、

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,加入底物工作液显蓝色,

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):8ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本:血清、

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,如此反复作对倍稀释,

3. 重复性:板内、

2. 以标准品8000、

6. 洗板:同前。形成免疫复合物连接在板上,

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