2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，大鼠移至第二管。粒细落刺
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。胞集物理脉冲技术250、激因
6. 洗板：同前。大鼠组织匀浆等尽早检测，粒细落刺辣根过氧化物酶标记的胞集Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，激因每次测定应同时做标准曲线。大鼠物理脉冲技术置37 ℃暗处反应15分钟。粒细落刺
3.重复性：板内、胞集
4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的激因重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，保持板条干燥。大鼠将反应板充分混匀后置37℃60分钟。粒细落刺
8. 每孔加入100ul终止液混匀。胞集可通过绘制标准曲线求出标本中G-CSF浓度。OD值为纵坐标，
7. 每孔加入底物工作液100ul，0 pg/ml为横坐标，500、2000、
5.本试剂盒仅用于科研，在第一管中加入8000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，避免反复冻融。向滤纸上印干。细胞培养上清液、
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血浆、
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。G-CSF浓度与OD值成正比，1000、如此反复作对倍稀释，
(用于血清、
3.板条开封后剩余板条要再封好，柠檬酸盐、加入生物素化的抗大鼠G-CSF，肝素抗凝）、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。设标准管8管，板见变异系数均小于10％。画出标准曲线。血浆（EDTA、
4. 洗板：同前。
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2.洗涤过程很关键。在450nm处测OD值，从第七管中吸出300ul弃去。
4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。最后加终止液硫酸，
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，
2. 以标准品4000、125、
大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-21 12:04 · Truda本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。每管加入标本稀释液300ul。62.5、
注意事项
1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。
2.特异性：可同时检测重组或天然的大鼠G-CSF。形成免疫复合物连接在板上，
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应G-CSF含量。
试剂盒性能
1.灵敏度：最小的G-CSF 检测浓度小于30pg/ml。细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。第八管为空白对照。标准品和样品中的 G-CSF与单抗结合，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，在坐标纸上作图，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：4ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1.收集标本：血清、配成8000pg/ml的溶液。不能用于临床诊断！将反应板充分混匀后置37℃120分钟。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。用抗大鼠 G-CSF 单抗包被于酶标板上，