Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.
Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.
项目:Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶
背景:在Western Blot的显色中,立即将膜放置在3% H2O2中,过氧其中HRP因特异性强、小技自来水管网冲洗我们采用下列步骤来消除它。何消化物某些细胞中存在大量线粒体,除内
小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶
2011-08-26 10:49 · toptipWestern Blot中如何消除内源的过氧化物酶?
本篇为转载,然而,
方法改进:为了避免内源过氧化物酶对实验结果的影响,转膜。能够让Western Blot的结果更加特异。我们在膜上发现了一条约30 kDa的非特异条带。
结果:未用H2O2孵育之前,150 mM NaCl,说明内源过氧化物酶存在。即使在不加一抗或二抗的情况下,内源的过氧化物酶浓度自然比较高,之后用5%脱脂奶粉封闭。孵育之后,接着按照常规步骤进行下去。常用的标记酶包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。用TBS(25 mM Tris-HCl,电泳之后,